Kimyəvi etiketləmə ilə hüceyrələrin fizioloji tarixinin qeyd edilməsi
Redaktorun xülasəsi
Hüceyrələrdə fizioloji tənzimləmə fəaliyyətini qeyd edən üsullar, bir zaman nöqtəsində fərdi snapshotlardan əldə edilə bilənlərdən daha çox hüceyrə tənzimlənməsinin daha dolğun görünüşünü təmin edə bilər. Huppertz
və başqaları . Hüceyrələrin flüoresan substrata məruz qaldığı müəyyən bir müddət ərzində dəyişdirilmiş zülalların bioloji aktivliyi sabit qeyd edə biləcəyi bir metod təqdim edir. Müəlliflər HaloTag metodunu dəyişdirdilər ki, bir etiket iki maraq doğuran zülal arasında bölündü və beləliklə, onların qarşılıqlı təsirinə nəzarət edildi. Onlar neyronlarda G proteini ilə əlaqəli reseptorların aktivləşdirilməsini və ya kalsiumdan asılı zülal qarşılıqlı təsirlərini əks etdirən zülal qarşılıqlı təsirlərini izləməklə yanaşma nümayiş etdirdilər. — L. Bryan Ray
mücərrəd
Hüceyrələrin fizioloji tarixinin qeydləri bioloji proseslər haqqında məlumat verir, lakin belə qeydləri əldə etmək çətin məsələdir. Bunu həll etmək üçün biz sonradan analiz üçün keçici hüceyrə hadisələrini qeyd etmək üçün bir üsul təqdim edirik. Biz həm spesifik hüceyrə fəaliyyətinin, həm də flüoresan substratın mövcudluğunda etiketlənən zülallar hazırladıq. Qeyd müddəti substratın mövcudluğu ilə müəyyən edilir, hüceyrə fəaliyyəti isə etiketləmə dərəcəsinə nəzarət edir. Fərqlənən substratların istifadəsi ardıcıl fəaliyyət dövrlərini qeyd etməyə imkan verdi. Zülal-zülal qarşılıqlı təsirlərini, G protein-qoşulmuş reseptorların aktivləşdirilməsini və hüceyrədaxili kalsiumda artımları qeyd etdik. Yüksək kalsium səviyyələrinin qeydləri transkriptomik analiz və milçəklərdə və zebra balıqlarında neyronal fəaliyyətlərin izlənilməsi üçün heterojen populyasiyalardan hüceyrələrin seçilməsinə imkan verdi.