Milli Təbiət Elmləri İnstitutları tərəfindən

Sadie Harley tərəfindən redaktə edilib , Robert Egan tərəfindən nəzərdən keçirilib

 Redaktorların qeydləri

 GIST

Tercih edilən mənbə kimi əlavə edin

Solda: Metil qrupları olan qalıqlar amin turşusu növünə görə rəng kodlu üçölçülü modeldə göstərilir. Sağda: Antikor Fc bölgəsinin NMR siqnalları və onların təyinatları. Müəllif: Saeko Yanaka, Koichi Kato

Monoklonal antikorlar xərçəngdən tutmuş otoimmün xəstəliklərə qədər müxtəlif xəstəliklərin müalicəsində geniş istifadə olunur. Bu bioloji dərmanların təhlükəsizliyi və effektivliyi onların yüksək dərəcəli strukturu (HOS) kimi tanınan düzgün üçölçülü təşkilatının qorunmasından asılıdır.

Lakin, antikorlarda incə struktur dəyişikliklərinin aşkarlanması əsas analitik çətinlik olaraq qalır. Dairəvi dikroizm və ya kalorimetriya kimi ənənəvi üsullar dəyərli qlobal məlumat verir, lakin ümumiyyətlə qalıq səviyyəsində həll yoluna malik deyil.

Nüvə maqnit rezonansı (NMR) spektroskopiyası, atom həllində məhluldakı zülal quruluşunu və dinamikasını müşahidə edə bilən azsaylı üsullardan biridir. Son illərdə NMR barmaq izi yanaşmaları terapevtik antikorlarda daha yüksək səviyyəli quruluşu qiymətləndirmək üçün getdikcə daha çox istifadə olunur. Lakin bu yanaşmaların əksəriyyəti ətraflı struktur şərhi vermək əvəzinə, ümumi spektral fərqləri aşkar edir.

Amerika Kimya Cəmiyyətinin Jurnalında dərc olunmuş bir araşdırmada , Həyat və Yaşayış Sistemləri üzrə Tədqiqat Mərkəzinin (ExCELLS) və əməkdaşlıq edən qurumların tədqiqatçıları insan IgG1 antikorlarının Fc bölgəsində metil siqnallarının sahəyə xas təyinatlarını müəyyən etdilər.

Tədqiqatçılar Fc domenində alanin, izolösin, lösin, metionin, treonin və valin daxil olmaqla bir çox qalıqdan metil rezonanslarını təyin etmək üçün amin turşusu-selektiv izotop etiketləmə, mutagenez və çoxölçülü NMR təcrübələrini birləşdirdilər.

Bu təyinatlar metil siqnallarının antikor strukturunun qalıq-spesifik zondları kimi fəaliyyət göstərməsinə imkan verir. Əhəmiyyətli olan odur ki, eyni siqnallar təbii izotop bolluğunda antikorlarda belə aşkar edilə bilirdi, yəni struktur analiz üçün izotop etiketlənməsi tələb olunmur.

Bu zondlardan istifadə edərək, tədqiqatçılar Fc bölgəsində qlikozilləşmə nümunələri ilə əlaqəli struktur fərqləri, o cümlədən antikor effektor funksiyalarına təsir etdiyi bilinən iki qlikan xüsusiyyəti olan nüvə fukozilləşməsi və terminal qalaktozilləşməsindəki dəyişiklikləri aşkar etdilər.

Tədqiqat həmçinin müəyyən metil siqnallarının antikorun yüksək dinamik bölgələrindən, o cümlədən menteşe bölgəsindəki qalıqlardan və reseptorla bağlanma interfeysindən qaynaqlandığını ortaya qoydu. Bu siqnallar lokal struktur elastikliyinin həssas rabitəçiləri kimi çıxış edərək molekulun funksional cəhətdən vacib bölgələrinə dair məlumat verir.

Metod antikorları birbaşa etiketlənməmiş formada təhlil edə bildiyindən, terapevtik antikorlarda struktur bütövlüyünün və incə molekulyar variasiyaların monitorinqi üçün yeni imkanlar açır. Bu cür imkanlar bioloji dərmanların keyfiyyətini təmin etmək və biooxiyarların inkişafında struktur müqayisəliliyini nümayiş etdirmək üçün getdikcə daha vacibdir.

“Terapevtik antikorlar struktur baxımından mürəkkəb molekullardır və hətta incə struktur dəyişiklikləri belə onların bioloji aktivliyinə təsir göstərə bilər”, – Milli Təbiət Elmləri İnstitutlarının Həyat və Yaşayış Sistemləri üzrə Tədqiqat Mərkəzindən (ExCELLS) Koiçi Kato bildirib.

“Tədqiqatımız göstərir ki, metil əsaslı NMR siqnalları etiketlənməmiş antikorlarda belə güclü struktur zondlar kimi xidmət edə bilər və antikor terapevtiklərinin qalıq səviyyəli struktur qiymətləndirilməsi üçün praktik bir yol təqdim edir.”

Bu tədqiqat, tədqiqatçıların IgG1 Fc bölgəsində qalığa xas və stereokimyəvi həllolmada metionin oksidləşməsini xarakterizə etmək üçün inteqrasiya olunmuş NMR və LC-MS yanaşması hazırladıqları Analytical Chemistry jurnalında dərc olunmuş əlaqəli bir məqaləni tamamlayır.

Bu iş, qorunan Fc qalıqları Met252 və Met428-də oksidləşmənin fərqli R- və S-sulfoksid formaları əmələ gətirdiyini və yerli antikor quruluşunu pozduğunu, oksidləşdirici modifikasiyaların antikor sabitliyinə və funksiyasına necə təsir etdiyinə dair mexaniki bir fikir verdiyini ortaya qoydu.

İki tədqiqat birlikdə həm yüksək səviyyəli struktur xüsusiyyətlərini, həm də terapevtik antikorların kimyəvi modifikasiyalarını qiymətləndirmək üçün hərtərəfli analitik çərçivə yaradır.

Nəşr detalları

Saeko Yanaka və digərləri, IgG1 Fc Bölgəsinin Struktur Qiymətləndirilməsi üçün Sahəyə Xas Metil Təyinatları ilə Etiketsiz NMR Yanaşması, Amerika Kimya Cəmiyyətinin Jurnalı (2026). DOI: 10.1021/jacs.5c18997

Maho Yagi-Utsumi və digərləri, İnteqrasiya olunmuş NMR və LC-MS Analizi ilə IgG1 Fc Bölgəsində Metionin Oksidləşməsinin Stereokimyəvi və Struktur Xarakteristikası, Analitik Kimya (2026). DOI: 10.1021/acs.analchem.5c06092

Jurnal məlumatı: Amerika Kimya Cəmiyyətinin Jurnalı , Analitik Kimya  

Milli Təbiət Elmləri İnstitutları tərəfindən təmin edilir